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关于间充质
干细胞三系诱导染色分析
一、MSC三系诱导基本介绍
干细胞，又称“万能细胞”，是一种未充分分化、尚不成熟的细胞，在适当条件下，具有再生各种组织、器官的潜能，因此被寄予厚望，干细胞研究也多次进入国自然研究热点排行榜前10。间充质干细胞（MSC）具有多向分化的潜能，体外在一定条件下可以诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞，2006年国际细胞治疗协会（ISCT）确定此三项检测指标是MSC鉴定的必检项目，MSC的三系诱导在生物医药领域一直深受各位科研人员的青睐和应用。
二、MSC三系分化检测手段
“成脂分化”
间充质干细胞成脂分化有两个阶段，先是MSC分化为脂肪前体细胞，接着在特定的细胞刺激影响下（如C/EBPs和PPAR-γ）最终分化为脂肪细胞，出现脂肪细胞中显著的标志物（脂肪滴）。对于脂滴染色，经常采用油红O染色方法对脂滴进行染色，其原理为油红O可进入脂滴与其特异性结合将其染成红色。我司有多款油红O染色试剂盒，分别适配于组织和细胞样本，用于细胞染色常推荐G1262，染色后结果可通过图像处理软件进行分析，如果想用于后续定量分析，可以染色后用无水异丙醇或乙醇浸泡细胞3-5min进行颜色提取，用离心管收集溶出的溶液，分取1ml稀释一定倍数进行紫外分光光度法测量520nm处的OD值。除此之外我们还拥有荧光法试剂盒（内含核染料）用于脂滴染色，结果对比清晰，染色灵敏。
染色示例
相关产品
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货号 |
名称 |
规格 |
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G1260 |
饱和油红O染色液 |
100ml/ 500ml |
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G1261 |
改良油红O染色试剂盒 |
2*50ml/ 2*100ml |
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G1262 |
油红O染色试剂盒 （细胞专用）HOT |
4*20ml/ 4*50ml |
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G1263 |
改良油红O染色试剂盒 (环保型) |
4*50ml |
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G1264 |
脂质荧光染色试剂盒 （尼罗红法）HOT |
2*50ml |
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G1265 |
糊精水溶液(1%) |
100ml |
“成骨分化”
MSC成骨分化分为两个时期，诱导初期会有碱性磷酸酶（ALP）的高度表达，作为成骨细胞分化成熟的早期标志，可通过固蓝染色来鉴别。诱导后期，成熟的成骨细胞表达ECM钙化相关蛋白，长时间的成骨诱导使钙离子以钙盐方式沉淀下来，形成“骨结节”。骨结节可通过茜素红S染色（茜素红和钙发生显色反应），把外面沉积的钙结节染成深红色，通过着色物面积和深浅来表示成骨分化的强弱。
对于茜素红染色，我们2024年上新了可以提取钙盐染色的辅助试剂-CPC（G1453），以及染色剂+提取剂的试剂盒套装（G3283），在完成茜素红染色后，加入提取试剂室温孵育15-30min使茜素红染色完全溶解，用离心管收集溶出的溶液，分取100ul或200ul置于96孔板条内用酶标仪测量560nm处的OD值，从而半定量钙盐含量。
染色示例
相关产品
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货号 |
名称 |
规格 |
分类 |
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G1480 |
碱性磷酸酶 染色试剂盒 (偶氮偶联法)HOT |
4*2ml/ 4*10ml/ 4*20ml |
ALP 染色 |
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G1481 |
碱性磷酸酶 染色试剂盒 (改良Gomori钙钴法) |
3*50ml |
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G1450 |
茜素红S染色液 (0.2%，pH8.3) |
100ml/ 500ml |
茜素红染色 |
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G1452 |
茜素红S染色液 (1%，pH4.2)HOT |
100ml |
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G1453 |
茜素红S染色 提取试剂 （CPC，10%）HOT |
100ml |
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G3280 |
钙盐染色试剂盒 (改良茜素红S 法) |
3*50ml |
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G3281 |
钙盐染色试剂盒 (茜素红S法) |
2*50ml |
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G3282 |
钙盐染色试剂盒 (Von Kossa法) |
2*50ml |
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G3283 |
茜素红S染色 定量检测试剂盒 （CPC法）HOT |
2*20ml/ 2*100ml |
“成软骨分化”
MSC成软骨分化可分为两个时期，首先MSC聚集成团，成团的中间细胞经分裂分化转变成一种大而圆的细胞，即成软骨细胞。然后成软骨细胞继续分化产生基质和纤维，不断交织形成软骨球状，可通过阿利新蓝来进行鉴别染色，阿利新蓝与软骨基质中的多糖结合，使软骨细胞和基质呈浅蓝色或蓝绿色。若想对软骨含量定量分析，可以使用G1567-阿利新蓝染色提取试剂在阿利新蓝染色后进行溶解提取颜色，室温孵育1-2h即可，用离心管收集溶出的溶液，分取100μL或200μL置于96孔板条内用酶标仪测量620nm处的OD值，从而达到半定量软骨含量目的。
染色示例
相关产品
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货号 |
名称 |
规格 |
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G1560 |
阿利新蓝染色试剂盒 (pH=2.5)HOT |
3*50ml/ 3*100ml |
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G1562 |
阿利新蓝染色液(pH2.5) |
100ml |
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G1563 |
阿利新蓝染色试剂盒 (pH=1.0) |
3*50ml |
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G1565 |
阿利新蓝染色试剂盒 (细胞专用) |
2*20ml/ 2*50ml |
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G1567 |
阿利新蓝染色提取试剂HOT |
100ml |
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G2541 |
软骨染色试剂盒 (阿利新蓝法，pH1.0) |
2*50ml |
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G2542 |
软骨染色试剂盒 (阿利新蓝法，pH2.5)HOT |
2*50ml |
本期产品分享就到这里啦，我们下期再见！！！