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钙离子指示剂与离子载体使用指南

作者:上海阿拉丁生化科技股份有限公司 2022-12-12T14:43 (访问量:2856)

钙离子指示剂与离子载体使用指南

阿拉丁帮助您寻找成像Ca2+和细胞功能的最佳指标和电离层。


钙(Ca2+)是一种重要的无处不在的第二信使,参与调节多种细胞过程,包括细胞增殖、基因转录、肌肉收缩和内吞作用。


使用本指南,我们可以为您的实验找到最佳的Ca2+指示器,螯合剂和离子团。


Ca2+指标一目了然

指示剂

激发波长(nm)

发射波长(nm)

Kd (nM)

Fura-2

340/380

505

145

Indo-1

346

475/405

230

Fluo-4

488

520

345

Fluo-8

490

520

390

Fluo-5

494

516

2300

Rhod-2

552

581

570


BAPTA

BAPTA是一种非荧光Ca2+螯合剂,从EGTA中提取,对Ca2+的选择性为Mg2+的105倍。它通常用于缓冲,在没有Mg2+的情况下,Kd为160 nM。也可提供AM形式。


Fura-2

Fura-2是第一种商业化的荧光钙指示剂。激发比为340 nm/380 nm,发射波长为505 nm。在科学文献中有成千上万的Fura-2参考文献,它是迄今为止最重要的Ca2+指示染料之一。


Indo-1

Indo-1与Fura-2在1986年同时推出。它也是比例的,但模式不同。当在346 nm激发时,它在475 nm/405 nm处表现出发射比,而不是激发比。与Fura-2不同,它有光漂白的倾向。它也被用于各种各样的应用,以大量的文献出版物为例。


Fluo-8

自1989年引入以来,荧光成像揭示了Ca2+信号通路中许多基本过程的空间动力学。在细胞实验中发现,Fluo-8(或Fluo-2介质亲和力)比Fluo-4更亮(1.5倍)。它改善了细胞负载和Ca2+响应,同时保持方便的Fluo-3和Fluo-4光谱波长,在490 nm处最大激发,在520 nm处最大发射。Fluo-8加载可在室温下进行。


Rhod-2

Rhod-2于1989年首次问世,其荧光激发极值在552 nm,发射极值在581 nm。在Ca2+结合之前,Rhod-2本质上是不荧光的,随着Ca2+浓度的增加,Rhod-2变得更加荧光。Rhod-2较长的激发和发射使该指示物在具有高水平自身荧光的细胞和组织的实验中非常有用,并可与其他波长较短的荧光染料进行多路复用。这些基于罗丹明的指示物的AM酯形式是阳离子的,这可以导致电位驱动的摄取进入线粒体。


Fluo-4 AM

Fluo-4是Fluo-3的类似物,两个氯取代基被氟取代,这导致荧光激发增强在488 nm,因此更高的荧光信号水平。


Fluo-5 AM

Fluo-5 AM是Fluo-4的类似物,但其钙结合亲和力降低,因此适合检测细胞内钙水平,这将饱和Fluo-4 AM指示剂。


钙离子载体

A23187(钙霉素)具有可被紫外光激发的固有荧光,使其对可被紫外光激发的Ca2+指示剂(如Fura-2)不太有用,但对长波长Ca2+指示剂(如Fluo-2)仍然有用。


4-溴A-23187是非荧光的,因此与所有Ca2+指示剂兼容。它通常用于荧光Ca2+指标的原位校准,以平衡细胞内和细胞外Ca2+浓度,并允许Mn2+进入细胞,淬灭细胞内的染料荧光。


离子霉素是一种有效的Ca2+离子胞体,通常用于校准荧光Ca2+指标和修改细胞内Ca2+浓度,并用于研究Ca2+在细胞过程中的调节特性。


参考文献

1.Erdahl WL, Chapman CJ, Taylor RW, Pfeiffer DR. Ca2+ transport properties of ionophores A23187, ionomycin, and 4-BrA23187 in a well defined model system. Biophys J. 1994 May;66(5):1678-93.
2. Drummond IA, Lee AS, Resendez E Jr, Steinhardt RA. Depletion of intracellular calcium stores by calcium ionophore A23187 induces the genes for glucose-regulated proteins in hamster fibroblasts. J Biol Chem. 1987 Sep 15;262(26):12801-5.

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